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实验室离心机都有哪几种常用的离心分离法

发布时间:2022-10-24浏览:268次

实验室离心机大家都知道主要是用于血液的分离、病毒的研究、DNA的研究、药品的提纯,对溶液中密度不同的粒子进行分离,是放射免疫、生物化学、农林科学等生产和科研单位的理想设备,但是我们实验室离心机对于不同的样品分离,离心分离法各不相同,适合的场合也尽不相同。那么常见的实验室离心机离心分离法都有那几种?


①差速离心法

差速离心法主要是采取逐渐提高离心速度的方法分离样品中不同密度的结构,如线粒体、叶绿体、蛋白质等!

第一步:设置起始的离心速度较低,先让较大的颗粒沉降到管底,小的颗粒仍然悬浮在上清液中。

第二步:收集沉淀,改用较高的离心速度离心悬浮液,将较小的颗粒沉降,以此类推,达到分离不同大小颗粒的目的。





优点:样品的处理量较大,可用于大量样品的初分离。

缺点:分离复杂样品和要求分离纯度较高时,离心次数多,操作繁杂,由于沉淀的多次清洗、溶解、再沉淀,容易引起中间损失,所以离心分辨力差。

②梯度离心法

密度梯度离心法是将样品加在离心管中预先增加梯度介质中进行速度沉降或沉降平衡,在一定的离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同区带的分离方法。

密度梯度离心法常用的介质为氯化铯,蔗糖和多聚蔗糖。





图3

优点:具有良好的分辨率,分离效果好;颗粒不会积压变形,能保持颗粒活性,并防止已形成的区带由于对流而引起混合;适应范围广,即能分离具有沉降系数差的颗粒,又能分离有一定浮力密度的颗粒。

缺点:样品浓度不能太高;达到平衡时间长。

③分析性超速离心法

分析性超离心法主要是为了研究生物大分子的沉降特性和结构,而不是专门收集某一特定组份。因此它使用了特殊的转子和检测手段,以便连续监视物质在一个离心场中的沉降过程。分析性超速离心机主要由一个椭圆形的转子、一套真空系统和一套光学系统所组成。该转子通过一个柔性的轴联接成一个高速的驱动装置,此轴可使转子在旋转时形成自己的轴。





图4

优点:加快液体中颗粒的沉降速度,把样品中不同沉降系数和浮力密度的物质分离开。

缺点:需要利用离心机产生强大的离心力,才能迫使这些微粒克服扩散产生沉降运动。



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